Bacterioscopia

Principio: O exame bacterioscópico consiste em analisar um esfregaço de material biológico corado pelo método de Gram, onde se observa que as bactérias:

• Gram-positivas, retém o corante cristal violeta e aparecem coradas em violeta-escuro;

• Gram-negativas, perdem o cristal violeta quando tratadas com álcool, então são coradas com o corante safranina e aparecem coradas em vermelho.

A caracterização das bactérias são feitas pela forma, disposição e comportamento tintorial.

Material: Material biológico (Secreçõoes purulentas, urina, fezes, etc.); Reagentes de Gram: sol. cristal-violeta 2%; sol. aquosa de iodo (Lugol); mistura álcool-acetona; sol. alcoólica de safranina1, Lâminas: Suporte para lâminas; alça de platina; Bico de Bunsen; Microscópio; Óleo de Imersão.

Método

• Preparar um esfregaço, fazendo movimento circular com swab na lâmina;

• Cobrir a área do esfregaço com a solução de cristal-violeta por cerca de 1min.;

• Lavar com água corrente e escorrer o excesso de água;

• Cobrir a área do esfregaço com a solução de iodo durante cerca de 1 minuto;

• Descorar a lâmina com a mistura álcool-acetona, até que o solvente escorra incolor;

• Cobrir o esfregaço com a solução de safranina1 por cerca de 30 segundos;

• Lavar com água corrente;

• Deixar secar ao ar e observar em lente de imersão (100X).

Resultados

Assinale os itens que caracteriza as bactérias observadas.

Comportamento tintorial: ( ) Gram-positiva (X) Gram-negativa

Formas: (X) Cocos ( ) Bacilos ( ) Espirilos ( ) Vibrios

Disposição: (X) Cocos isolados e aos pares - Diplococos

( ) Cocos isolados e agrupados em cachos – Estafilococos

( ) Cocos isolados e agrupados em cadeia – Estreptococos

( ) Cocos isolados e agrupados de 4 em 4 – Sarcina

( ) Bacilos isolados e agrupados aos pares – Diplobacilos

( ) Bacilos isolados e agrupados em cadeias – Estreptobacilos

( ) Bacilos espessos e longos ( ) Bacilos curtos e finos