Principio: O exame bacterioscópico consiste em analisar um esfregaço de material biológico corado pelo método de Gram, onde se observa que as bactérias:
Gram-positivas, retém o corante cristal violeta e aparecem coradas em violeta-escuro;
Gram-negativas, perdem o cristal violeta quando tratadas com álcool, então são coradas com o corante safranina e aparecem coradas em vermelho.
A caracterização das bactérias são feitas pela forma, disposição e comportamento tintorial.
Material: Material biológico (Secreçõoes purulentas, urina, fezes, etc.); Reagentes de Gram: sol. cristal-violeta 2%; sol. aquosa de iodo (Lugol); mistura álcool-acetona; sol. alcoólica de safranina1, Lâminas: Suporte para lâminas; alça de platina; Bico de Bunsen; Microscópio; Óleo de Imersão.
Método
• Preparar um esfregaço, fazendo movimento circular com swab na lâmina;
• Cobrir a área do esfregaço com a solução de cristal-violeta por cerca de 1min.;
• Lavar com água corrente e escorrer o excesso de água;
• Cobrir a área do esfregaço com a solução de iodo durante cerca de 1 minuto;
• Descorar a lâmina com a mistura álcool-acetona, até que o solvente escorra incolor;
• Cobrir o esfregaço com a solução de safranina1 por cerca de 30 segundos;
• Lavar com água corrente;
• Deixar secar ao ar e observar em lente de imersão (100X).
Resultados
Assinale os itens que caracteriza as bactérias observadas.
Comportamento tintorial: ( ) Gram-positiva (X) Gram-negativa
Formas: (X) Cocos ( ) Bacilos ( ) Espirilos ( ) Vibrios
Disposição: (X) Cocos isolados e aos pares - Diplococos
( ) Cocos isolados e agrupados em cachos – Estafilococos
( ) Cocos isolados e agrupados em cadeia – Estreptococos
( ) Cocos isolados e agrupados de 4 em 4 – Sarcina
( ) Bacilos isolados e agrupados aos pares – Diplobacilos
( ) Bacilos isolados e agrupados em cadeias – Estreptobacilos
( ) Bacilos espessos e longos ( ) Bacilos curtos e finos
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